AAT Bioquest  16356  Cell Meter™ 熒光細(xì)胞內(nèi)一氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒

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AAT Bioquest熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮活性試劑盒-常備現(xiàn)貨

美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan

美國(guó)AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AAT Bioquest的產(chǎn)品幫助 quan 世 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

 jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

Cell Meter™ 16356 熒光細(xì)胞內(nèi)一氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒 *針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的紅色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：16356

產(chǎn)品名稱：熒光細(xì)胞內(nèi)一氧化氮（NO）活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：100 Tests

AAT Bioquest熒光細(xì)胞內(nèi)yi氧化氮活性試劑盒-常備現(xiàn)貨 

Cell Meter™ 16356熒光細(xì)胞內(nèi)一氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒 *針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的紅色熒光*  100 Tests，產(chǎn)品說明：

一氧化氮（NO）是一種重要的生物調(diào)節(jié)因子，參與許多生理和病理過程。NO生成改變與各種免疫，心血管，神經(jīng)退行性和炎癥性疾病有關(guān)。作為一種自由基，NO被迅速氧化，體內(nèi)存在的NO濃度相對(duì)較低。檢測(cè)和理解NO在生物系統(tǒng)中的作用一直具有挑戰(zhàn)性。細(xì)胞計(jì)™熒光法細(xì)胞內(nèi)一氧化氮檢測(cè)試劑盒提供了一種靈敏的工具，用于監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中的細(xì)胞內(nèi)NO水平。我們的試劑盒中開發(fā)并使用了硝酸™探針，作為DAF-2的jue jia 替代品，用于檢測(cè)和成像細(xì)胞中的游離NO。與常用的DAF-2探針相比，硝酸™探針具有更好的光穩(wěn)定性和增強(qiáng)的細(xì)胞通透性。該特殊試劑盒使用硝™基紅，可以與NO反應(yīng)產(chǎn)生具有類似于德克薩斯紅®光譜特性的亮紅色熒光產(chǎn)物。Nitrixyte™ Red可以很容易地加載到活細(xì)胞中，并且可以使用Red濾光片組方便地監(jiān)測(cè)其熒光信號(hào)。該試劑盒針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化。

平臺(tái)

流式細(xì)胞儀

Excitation：488 nm 激光

Emission：610/20 nm 濾光片

儀器規(guī)格：德州紅色頻道

組件

組分A：500X氮化硅紅色™     1 瓶 （100 μL）

組分B：非陽性對(duì)照    1瓶（凍干粉）

組分C：檢測(cè)緩沖液‘’1‘’ ‘’瓶‘’ ‘’（‘’1‘’0‘’ ‘’m‘’L‘’）‘’

1.    ‘’準(zhǔn)‘’備‘’細(xì)‘’胞‘’：‘’（‘’0‘’.‘’5‘’ ‘’-‘’ ‘’1‘’ב’1‘’0‘’6‘’細(xì)‘’胞‘’/毫升）

2.    加入 1 μL：合物和硝酸™紅在37oC下孵育細(xì)胞所需的時(shí)間

3.    使用610/20 nm濾光片用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞

重要事項(xiàng)：在開始實(shí)驗(yàn)之前，在室溫下解凍所有組分。

儲(chǔ)備溶液的制備：

除非另有說明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

非酸陽性對(duì)照治療儲(chǔ)備溶液（50 mM）

將 200 uL ddH 2 O 加入 NONOate 陽性對(duì)照（組分 B）的小瓶中，制成 50 mM NONOacte 陽性對(duì)照治療儲(chǔ)備溶液。

工作溶液的制備

用測(cè)定緩沖液（組分C）稀釋50 mM NONOate陽性對(duì)照處理儲(chǔ)備溶液，制成1-2 mM NONOate陽性對(duì)照工作溶液。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1.    對(duì)于每個(gè)樣品，在您選擇的 0.5 mL 溫?zé)崤囵B(yǎng)基或緩沖液中制備細(xì)胞，密度為 5×105至 1×106細(xì)胞/毫升。注意：應(yīng)單獨(dú)評(píng)估每個(gè)細(xì)胞系，以確定NO誘導(dǎo)的最佳細(xì)胞密度。

2.    將 1 μL 500X 亞硝酸™紅（組分 A）加入 0.5 mL 細(xì)胞懸液中。注意：對(duì)于貼壁細(xì)胞，用0.5mM EDTA輕輕提起細(xì)胞以保持細(xì)胞完整，并在用硝酸™紅孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞一次。

3.    將細(xì)胞與測(cè)試化合物和硝酸™紅在37oC下孵育所需的時(shí)間，以產(chǎn)生內(nèi)源性或外源性NO。 注意：適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所使用的單個(gè)細(xì)胞類型和測(cè)試化合物。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。注意：我們使用 Raw 264.7 細(xì)胞在 20 oC 的細(xì)胞培養(yǎng)基中與硝酸™紅工作溶液、1 μg/mL 脂多糖 （LPS） 和 37 mM L-精an酸 （L-Arg） 一起孵育 16 小時(shí)。

4.    將用硝基™紅預(yù)孵育30分鐘的細(xì)胞旋轉(zhuǎn)下來。用1mM DEA NOate陽性對(duì)照工作溶液重懸細(xì)胞，并在37oC下再孵育30分鐘。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參見圖 1。

5.    使用流式細(xì)胞儀中的610/20 nm濾光片監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。對(duì)感興趣的細(xì)胞進(jìn)行門控，不包括碎片。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

16356熒光細(xì)胞內(nèi)一氧化氮 （NO） 活性檢測(cè)試劑盒 *針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)優(yōu)化的紅色熒光*  100 Tests